Immunolocalization of FGF-2 and VEGF in rat periodontal ligament during experimental tooth movement

OBJECTIVE: This article aimed at identifying the expression of fibroblast growth factor-2 (FGF-2) and vascular endothelial growth factor (VEGF) in the tension and pressure areas of rat periodontal ligament, in different periods of experimental orthodontic tooth movement. METHODS: An orthodontic force of 0.5 N was applied to the upper right first molar of 18 male Wistar rats for periods of 3 (group I), 7 (group II) and 14 days (group III). The counter-side first molar was used as a control. The animals were euthanized at the aforementioned time periods, and their maxillary bone was removed and fixed. After demineralization, the specimens were histologically processed and embedded in paraffin. FGF-2 and VEGF expressions were studied through immunohistochemistry and morphological analysis. RESULTS: The experimental side showed a higher expression of both FGF-2 and VEGF in all groups, when compared with the control side (P < 0.05). Statistically significant differences were also found between the tension and pressure areas in the experimental side. CONCLUSION: Both FGF-2 and VEGF are expressed in rat periodontal tissue. Additionally, these growth factors are upregulated when orthodontic forces are applied, thereby suggesting that they play an important role in changes that occur in periodontal tissue during orthodontic movement. .

OBJETIVO: o objetivo desse estudo foi identificar a expressão do fator de crescimento de fibroblastos 2 (FGF-2) e do fator de crescimento vascular endotelial (VEGF) nos lados de tensão e pressão do ligamento periodontal de ratos, durante movimento ortodôntico experimental, em diferentes períodos de tempo. MÉTODOS: uma força ortodôntica de 0,5N foi aplicada no primeiro molar superior direito de 18 ratos Wistar machos, por períodos de 3 (grupo I), 7 (grupo II) e 14 dias (grupo III). O primeiro molar do lado oposto foi utilizado como controle. Os animais foram sacrificados nos períodos de tempo mencionados, sendo a arcada superior removida e fixada. Após a desmineralização, os espécimes foram processados histologicamente e embebidos em parafina. A expressão do FGF-2 e do VEGF foram estudadas por meio de análise imuno-histoquímica. RESULTADOS: o ligamento periodontal dos dentes submetidos à movimentação ortodôntica mostraram maior expressão tanto de FGF-2 quanto de VEGF, em todos os grupos experimentais, quando comparados com os dentes do lado controle (p < 0,05). Diferenças estatisticamente significativas entre os lados de tensão e pressão também foram encontradas nos dentes submetidos à movimentação ortodôntica. CONCLUSÕES: tanto o FGF-2 quanto o VEGF são expressos no tecido periodontal de ratos, e esses fatores de crescimento são aumentados quando forças ortodônticas são aplicadas, sugerindo que esses desempenham um papel importante na reorganização do periodonto durante o movimento ortodôntico. .

Estudo das condições microbiológicas de farinhas de mandioca (Manihot esculenta Crantz) comercializadas no centro de abastecimento de Alagoinhas, Bahia / Study of the microbiological conditions of marketing of cassava (Manihot esculenta Crantz) flour in supply center of Alagoinhas, Bahia

No município de Alagoinhas, Bahia, e na maioria dos estados do Nordeste, a farinha de mandioca (Manihot esculenta Crantz) é produzida de forma artesanal em casas-de-farinha, na maioria das vezes localizadas no próprio local de plantio da mandioca. Este trabalho teve como objetivo avaliar as condições microbiológicas de farinhas de mandioca comercializadas no Centro de Abastecimento em Alagoinhas-Bahia. Foram coletadas 100 gramas de 30 amostras de farinha de mandioca, as quais foram acondicionadas em frascos estéreis, em recipiente isotérmico. As amostras foram submetidas à pesquisa de bactérias heterotróficas empregando-se o método de contagem padrão em placas, seguido da coloração de Gram, e a pesquisa para coliformes totais e termotolerantes foi realizada pela técnica do Número Mais Provável (NMP). Os resultados indicam que as amostras estão em conformidade com a legislação vigente em relação à análise de coliformes totais e termotolerantes (<3NMPg-1), na contagem de bactérias heterotróficas algumas amostras mostraram-se fora dos padrões aceitáveis. Na coloração de Gram foram observados bacilos, diplobacilos e estreptobacilos Gram positivos e Gram negativos e cocos, diplococos e estafilococos Gram positivos. A avaliação sanitário-ambiental revelou más condições de comercialização da farinha de mandioca no Centro de Abastecimento de Alagoinhas.

In the city of Alagoinhas, Bahia, and in most Northeastern states, the cassava (Manihot esculenta Crantz) flour is produced in a craft house, most often located in the place of production. This study aimed to evaluate the microbiological conditions of cassava flours marketed Supply Centre in Alagoinhas, Bahia. We collected 30 samples of cassava flour, 100 grams, which were placed in sterile, insulated container. The samples were tested for heterotrophic bacteria using the method of standard plate count, followed by Gram staining, the search for total and fecal coliforms was performed by the Most Probable Number (MPN). The results indicate that the samples that the samples are in accordance with current legislation regarding the analysis of total coliforms and thermotolerant (<3NMPg-1), the count of heterotrophic bacteria some samples were outside the acceptable standards. In Gram staining bacilli were observed, and diplobacillus estreptobacilos Gram positive and Gram negative cocci, diplococci and staphylococci Gram posotivos. The assessment of health and environmental conditions revealed but the marketing of cassava flour in the Central Supply Alagoinhas.

Antibody response to a chromatographic fraction of Porphyromonas gingivalis and its correlation with periodontal status

Porphyromonas gingivalis tem sido fortemente associado à gravidade das doenças periodontais e estimula respostas celulares e humorais no hospedeiro. Objetivo: Correlacionar os níveis de IgA, IgG e subclasses de IgG contra uma fração cromatogrßfica do extrato de Porphyromonas gingivalis ATCC33277 extract e descritores clínicos periodontais. Material e Métodos: Indivíduos com periodontite (29) e com saúde periodontal (26) foram avaliados de acordo com as medidas de profundidade de sondagem, sangramento à sondagem e nível de inserção clínica. O extrato de Porphyromonas gingivalis foi fracionado por cromatografia de troca iônica e a resposta humoral contra a fração IV foi avaliada por ôenzyme linked immunosorbent assayõ. Resultados e Conclusão: O percentual de sítios com sangramento à sondagem (critério 1) estava correlacionado significativamente com os níveis séricos de IgG2 (r = 0,385; p < 0,05). Os níveis de IgG total e IgG2 correlacionaram-se significativamente com o percentual de sítios com nível de inserção clínica (NIC) ≥ 3 mm (critério 2) (r = 0,428; p < 0,05 e r = 0,510; p < 0,01, respectivamente), NIC ≥ 5 mm (critérion 3) (r = 0,499 e r = 0,518, respectivamente; p < 0,01) e percentual de sítios com NIC ≥ 3 mm associado a profundidade de sondagem ≥ 4 mm e sangramento à sondagem no mesmo sítio (criterion 4) (r = 0,607; p < 0,001 e r = 0,487; p < 0,01, respectivamente). Foi observada uma correlação positiva estatisticamente significante entre os níveis de IgGA e IgG1 e o critério 4 (r = 0,339 e r = 0,345, respectivamente; p < 0,05), e entre os níveis de IgG3 e o critério 3 (p < 0,05; r = 0,370). Estes resultados indicam que quanto mais acurado for o critério de diagnóstico empregado para a determinação da doença periodontal, maiores os níveis séricos de imunoglobulinas.

SDS-PAGE and Western blot analysis of somatic and extracellular antigens of Corynebacterium pseudotuberculosis

Diferentes técnicas para isolar e descrever antígenos das frações secretadas de superfície e somáticas deCorynebacterium pseudotuberculosis foram estudadas por SDS-PAGE e imunoblot, utilizando-se pool de soros de cabras naturalmente infectadas. Os antígenos secretados foram obtidos do sobrenadante de cultura da bactéria cultivada em meio quimicamente definido ou em meio BHI (Brain Heart Infusion). A fração de superfície foi obtida por tratamento com NaCl 1M, e as frações somßticas foram obtidas por vários procedimentos (detergentes e ultra-som). Pela coloração por Coomassie blue, foram detectadas 20 bandas na fração secretada, 35 bandas no extrato de superfície e entre 40 e 50 bandas, a depender do processo de extração, na fração somßtica. Entre todas as frações estudadas, foram detectadas 16 proteínas imunorreativas. As bandas com pesos moleculares de 125, 108, 75, 68, 41, 40, 31 e 24 kDa foram reconhecidas commaior intensidade e todas elas foram encontradas na fração secretada. A utilização do meio quimicamente definido permitiu revelar, na fração secretada de C. pseudotuberculosis, a presença de proteínas de alto pesomolecular que não tinham sido previamente descritas.

Reconhecimento de antígenos por anticorpos de caprinos naturalmente infectados ou imunizados contra Corynebacterium pseudotuberculosis / Antigen recognition by antibodies against Corynebacterium pseudotuberculosisfrom naturally infected or immunized goats

Corynebacterium pseudotuberculosis é um cocobacilo gram-positivo, patógeno intracelular facultativo de macrófagos, filogeneticamente relacionado com o Mycobacterium tuberculosis. É amplamente distribuído em algumas espécies de animais, causando a linfadenite caseosa em ovinos e caprinos. A linfadenite caseosa, de ocorrência mundial, é uma doença infecciosa crônica cuja transmissão se dá principalmente através da pele. No presente experimento, foram estudados aspectos do reconhecimento antigênico, pela resposta humoral, em caprinos criados em regime extensivo, naturalmente infectados ou imunizados com uma vacina viva (cepa 1002), atenuada, desenvolvida pela Empresa Baiana de Desenvolvimento Agrícola (EBDA). As amostras de soros dos animais imunizados e de controle, coletadas mensalmente por um período de doze meses, foram analisadas pelo ensaio imunoenzimático ELISA e pelo Western blotting, utilizando-se como antígenos o extrato bacteriano contendo exotoxina e sonicado bacteriano de uma cepa selvagem e da cepa 1002. A análise através do Western blotting revelou que o padrão de antígenos reconhecidos pelos anticorpos séricos de animais imunizados, sem raça definida (SRD) ou de duas raças puras, bem como animais SRD naturalmente infectados, é semelhante, verificando-se bandas protéicas com pesos moleculares entre 20 e 94 kDa. Esta análise possibilitou observar-se que diferentes proteínas são reconhecidas ao longo da imunização.

Avaliação da resposta imune humoral em caprinos inoculados com uma vacina viva atenuada liofilizada contra Corynebacterium pseudotuberculosis / Evaluation of the goats humoral immune response induced by the Corynebacterium psudotuberculosis lyophilized live vaccine

A linfadenite caseosa (LC), comumente chamada de mal-do-caroço, é uma doença que acomete ovinos e caprinos e tem como agente etiológico Corynebacterium pseudotuberculosis. É um patógeno intracelular facultativo de macrófagos e é filogeneticamente relacionado com Mycobacterium tuberculosis. É uma doença de ocorrência mundial, caracterizada por formação de lesões necróticas encapsuladas caseosas, localizada principalmente nos linfonodos externos e pulmões. A transmissão se dá provavelmente através da pele, pelo contato de animais sadios com animais portadores de abscessos que evoluem a supuração. Eventualmente, tem sido encontrada em bovinos, porém é em ovinos e em caprinos que assume importância econômica e sanitária. Machos e fêmeas podem apresentar a doença em qualquer estação, porém encontram-se mais doentes com o desenvolver da idade, principalmente após um a dois anos de vida. A enfermidade causa sérios prejuízos a essas espécies, constituindo uma limitação zoopatológica às suas explorações. Com cerca de 80 por cento do rebanho nacional, a região Nordeste é a maior detentora de caprinos do Brasil, onde esses animais são essenciais ao sustento do pequeno agricultor. Corynebacterium pseudotuberculosis causa consideráveis prejuízos econômicos à região, que vão desde a condenação de pele e carcaças em razão de abscessos, até perdas em eficiência na reprodução ou na produção de carne e leite. O presente trabalho teve como objetivo avaliar em caprinos a resposta imune humoral induzida pela vacina viva liofilizada, elaborada com a cepa 1002, da Empresa Baiana de Desenvolvimento Agrícola (EBDA). Os resultados evidenciaram que o referido preparado liofilizado promove a produção de anticorpos específicos em doses iguais ou maiores do que 109 CFU e que o tratamento ministrado não provocou lesões nos animais vacinados.